科研干货｜盘点抗生素种类以及常用检测方法

 抗生素，是指由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。抗生素等抗菌剂的抑菌或杀菌作用，主要是针对“细菌有而人（或其他动植物）没有”的机制进行杀伤，包含四大作用机理，即：抑制细菌细胞壁合成，增强细菌细胞膜通透性，干扰细菌蛋白质合成以及抑制细菌核酸复制转录。

抗生素分类

一、β-内酰胺类抗生素：青霉素类、头孢菌素类、β-内酰胺酶抑制药等。

二、大环内酯类抗生素：红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等。

三、氨基甙类抗生素：卡那霉素、链霉素、庆大霉素、依替米星等。

四、四环素类抗生素：四环素、土霉素、强力霉素等。

五、林可霉素类抗生素：林可霉素和克林霉素。

六、氯霉素类抗生素：氯霉素和硫霉素。

七、喹诺酮类：氟哌酸、氧氟沙星、洛美沙星等“沙星”。

八、其他抗细菌的抗生素：去甲万古霉素、磷霉素、卷曲霉素、利福平等。

抗生素效价

抗生素是一种生理活性物质，它对生命现象很敏感，可以用抗生素的生物效能表示它的效价，其最小效价单元就叫做“单位”(U)。经由国际协商规定出来的标准单位，称为“国际单位”(IU)通常各种抗生素的单位，是根据国家抗生素标准品测定出来的，是衡量药物有效成份的一种尺度。化学合成和半合成的抗菌药物都以重量表示，生物合成的抗生素以效价表示，并同时注明与效价相对应的重量。效价是以抗菌效能(活性部分)作为衡量的标准，因此，效价的高低是衡量抗生素质量的相对标准。效价以“单位”(U)来表示。

生物药中抗生素残留

目前抗生素的残留一般存在于疫苗类药物中，虽然抗生素不是疫苗中的必须成分，但在一些疫苗的制备过程中，为了防止细菌污染，需要添加一些抗生素。在最终成品前，还要尽量去除抗生素。我国在2010版以后的药典中均规定：疫苗中如果添加了抗生素，成品中所有抗生素累计残留量不得超过50ng/剂。

抗生素残留量常用检测方法

• 抑菌圈测量法

      抑菌圈法又叫扩散法，是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈。抑菌圈直径的大小是抗生素效价的直观体现，可以根据抑菌圈大小对抗生素的效价进行定性或定量的判定。抑菌圈法简单易行、成本低廉，是一种经典的检测方法，但此方法耗时较长，并且如果要降低人为判断结果的主观因素，需配备抑菌圈分析仪。

• 液相色谱串联质谱法

      液相色谱串联质谱（LC-MS-MS）是继气质联用和液质联用以后发展起来的又一新型分离检测技术。其具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高、易排除杂质干扰、定性定量精准等众多特点，非常适合于多组分快速检测。近年来，国内外众多学者也开始选用LC-MS-MS进行各种基质样品中抗生素的分析检测，灵敏度高，选择性和特异性较好，定性定量准确。但此方法需要配备相应质谱设备，操作复杂，且通量较低。

• 酶联免疫吸附法

      酶联免疫吸附检测技术是一种基于抗原-抗体反应的测定方法，多用于测量蛋白质等大分子的检测，也适用于抗生素这种小分子物质。其原理是通过形成三明治结构（双抗夹心法）或竞争限量酶标抗体（竞争法）后，通过酶标记抗体与底物的显色反应，根据颜色的深浅（吸光度）进行定量检测。相较于前两种抗生素检测方法，该方法用时短，操作简便，定量准确且具有高通量等特点，非常适合抗生素的检测。

君研生物卡那霉素定量检测试剂盒

卡那霉素是氨基糖甙类抗生素，应用于动物疾病的治疗、菌株筛选以及细胞和基因治疗药物原料制备中，由于其具有神经毒性和肾脏毒性，损害第8对脑神经，导致前庭和耳蜗损伤。在动物食品、生物药品中的残留会影响人类健康，甚至引起过敏反应。欧美国家及我国均要求其限量使用。      君研生物的卡那霉素定量检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，微孔条上预包被的偶联卡那霉素抗原与样品中残留的卡那霉素竞争结合酶标记的抗卡那霉素单克隆抗体，之后通过加入TMB底物显色，使用酶标仪检测吸光值，吸光值与样品中卡那霉素的含量成负相关。本试剂盒操作时间仅需一个半小时，试剂盒灵敏度为1ng/ml，线性范围为1.56ng/ml-50ng/ml。

君研生物庆大霉素残留检测试剂盒

庆大霉素系从放线菌科单孢子属发酵培养液中提得，系碱性化合物，是常用的氨基糖苷类抗生素，广泛应用于培养基配制。在临床上主要用于治疗细菌感染。庆大霉素具有神经毒性、肾脏毒性以及耳毒性。其在动物食品、生物药品中的残留会影响人类健康，甚至引起过敏反应。欧美国家及我国均要求其限量使用。

君研生物的庆大霉素定量检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，微孔条上预包被的庆大霉素抗原与样品中残留的庆大霉素竞争结合酶标庆大霉素单克隆抗体，之后加入酶标二抗，再通过加入TMB底物显色，使用酶标仪检测吸光值，吸光值与样品中庆大霉素的含量成负相关。本试剂盒操作时间仅需一小时左右，线性范围为0.1ng/mL-10ng/mL。