揭秘Benzonase核酸酶：科研与制药界的“核酸清道夫”

发现之旅

Benzonase核酸酶，这位“核酸界的清道夫”，是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶，亦称全能核酸酶或广谱核酸酶。科学家巧妙地从大自然的宝库中提取其基因，并通过基因工程技术使其高效表达。由此诞生了Benzonase，成为实验室和工业界信赖的伙伴。

作用机制

不同于传统的限制性内切酶，Benzonase核酸酶展现出了非凡的“普遍切割”能力。能够无序列特异性地切割单链和双链DNA以及RNA，其切割位点位于磷酸二酯键上，有效地将核酸降解为更小的片段，直至单核苷酸。任何形式的核酸，都逃不过它的“剪刀手”。这种非特异性切割机制使得Benzonase在去除样品中的核酸污染方面尤为出色，确保后续实验的顺利进行。

主要应用

1.生物制药：在生物药物的下游纯化过程中，Benzonase经常被用来降解细胞裂解物中的DNA和RNA，减少其对蛋白纯化步骤的潜在干扰，提高产物的纯度和收率。这对于疫苗、抗体、重组蛋白和细胞治疗等生物制品的制备尤为重要。

2.分子生物学实验：在提取蛋白质、亚细胞结构或病毒颗粒时，使用Benzonase可以有效去除核酸，减少其对后续电泳、质谱分析或免疫沉淀等实验的影响。

3.细胞培养：在细胞培养物的收获过程中，添加Benzonase有助于去除分泌到培养基中的核酸，保持培养体系的清洁，尤其是在连续培养或无血清培养中。

4.科学研究：在基因表达分析、细胞信号传导研究等领域，通过Benzonase处理样本，可以减少核酸对蛋白质相互作用研究的干扰，提高实验的准确性和可靠性。

使用优势

•高效性：Benzonase能在较短时间内完全降解大量核酸。

•广谱性：对所有类型的核酸均具有切割活性，无需针对特定序列设计。

•稳定性：在较宽的pH值和温度范围内保持活性，适合多种实验条件。

•低毒性：由于其来源于细菌，对哺乳动物细胞毒性极低，适合体外及细胞内应用。

注意事项

尽管Benzonase核酸酶具有诸多优点，但在使用时仍需注意其对实验设计的可能影响，特别是在那些核酸完整性至关重要的研究中。此外，操作时应采取适当的安全措施，因为核酸酶溶液可能对操作者造成潜在的生物危害。最后，在处理过的生物制品中，可能存在微量全能核酸酶残留，需要去除，因为这些微量残留会对后续生物制品的应用造成一定的影响。

全能核酸酶定量检测试剂盒

君研生物经过严格的方法学验证，自主研发基于ELISA法的全能核酸酶定量检测试剂盒，可以准确检测市面上包括Benzonase®核酸酶在内的绝大多数全能核酸酶，具有良好的通用性。

产品优势

• 通用性强：可准确检测市面上国内外多款全能核酸酶产品

• 灵敏度高：定量限（加标定量限）可达0.05ng/mL，能检测微量核酸酶残留

• 性能稳定：可提供符合药典要求的全性能验证报告

• 货期稳定：自主研发，货期短

检测原理

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中全能核酸酶（以下简称核酸酶）的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，随后加入标准品和检测样品，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成一个固相抗体-核酸酶-标记抗体的三明治结合物，反应结束后洗涤，然后加入底物进行显色反应，底物在HRP的催化下由无色转变成蓝色，并在终止液的作用下转变成最终的黄色（如下图）。

验证数据

• 标准曲线验证

标准曲线是经4-PL拟合得到，检测范围在0.0512-5ng/mL，R²可达到0.99。

• 试剂盒通用性

A.君研生物全能核酸酶定量检测试剂盒（KEB01-96）可检测多款核酸酶标准品，检测准确度基本一致。B.君研生物全能核酸酶定量检测试剂盒 (KEB01-96)可以用于检测不同品牌的全能核酸酶。

• 准确度和精密度

经验证，君研生物全能核酸酶定量检测试剂盒（KEB01-96）批内差≤10%，批间差≤15%，精密度符合标准。

• 样品加标回收率检测

经验证，君研生物全能核酸酶定量检测试剂盒（KEB01-96）实际样品回收率在80%~120%范围内。