科研干货丨组织解离好帮手---胶原酶的选择与残留检测

胶原酶是一种来源于溶组织梭菌的蛋白酶，适用于不同组织的解离。胶原酶在间充质干细胞分离及获取、3D及类器官培养、单细胞测序、肿瘤研究等领域都有广泛的应用。

胶原酶的发现

1982年Peterkofsky和1987年Birkedal-Hansen发现细菌的胶原蛋白酶与脊椎动物的胶原酶不同，它们有更广泛的底物单一性。1975年Woolley 和1974年Gross等多位研究人员发现细菌胶原蛋白酶不像动物的胶原酶仅分解胶原蛋白天然的三维螺旋结构，细菌胶原蛋白酶独特性体现在既能降解非水溶性的天然胶原蛋白又能降解水溶性的变性蛋白。1992年Mookhtiar 和 Van Wart发现细菌胶原蛋白酶能降解几乎所有的胶原蛋白类型，并在三维螺旋区域内有多种分裂形成。

为何选用胶原酶解离组织

胶原酶（Collagenase）是肽链内切酶，它能在生理温度和PH条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，胶原蛋白则是动物细胞外结缔组织的主要纤维成分。胶原酶的这种功能主要是由于它可以特异性地识别Pro-X-Gly-Pro序列并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键，而该序列高频率地存在于胶原蛋白中，胶原酶也是唯一可以降解广泛存在于结缔组织中具有三股螺旋的天然胶原纤维的蛋白酶。胶原酶还够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得胶原酶产品非常适用于组织解离。

不同品牌胶原酶信息汇总

市面上商业化提供的细菌胶原酶主要源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（梭菌蛋白酶A clostridiopeptidase A），能够降解天然胶原和网状纤维，还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等。根据胶原酶活性的差异，可以分为胶原酶I型、II型III型、IV型和V型，可作用于不同类型的组织解离。

组织细胞解离常用酶强弱信息表

君研生物自主研发的“胶原酶I型（Collagenase Type I）定量检测试剂盒”采用基于多克隆抗体的双抗夹心酶联免疫吸附法，针对从溶组织梭状芽孢杆菌中获得的胶原酶混合物而开发，可以快速，有效地检测各种样品中胶原酶的残留量。