MDCK细胞是Madin和Darby于1958年从Cocker Spaniel 肾脏组织分离培育建立的细胞株,通常是以贴壁细胞方式生长的上皮样细胞,最初多采用血清贴壁培养方式,但传统二维平面培养不利于逐级放大,微载体的发现和使用实现了MDCK细胞悬浮培养,可有效增大细胞培养量和病毒收获量。
与其他培养细胞相比,MDCK细胞具有以下特点:
MDCK细胞具有清晰的顶端-基底外侧极性、清晰的细胞连接,适合共聚焦成像
MDCK细胞比Vero、MRC-5、WI-38等细胞系增殖能力强,流感病毒在MDCK细胞中复制得更快,不易发生突变,能支持流感病毒的高滴度复制
MDCK细胞从有血清转为无血清培养时,表现出低敏感性,容易适应无血清培养和悬浮培养,适合通过大型生物反应器规模化生产
相较于其他细胞,MDCK细胞制备的流感疫苗具有相似的免疫原性和相当的抗原产量,生产工艺更易于规模化,不受限于鸡胚的供应
MDCK细胞中病毒的繁殖不需要频繁添加胰蛋白酶
体外研究数据表明,MDCK细胞的衍生成分不具有致敏性
基于MDCK细胞的特点,主要应用于:
广泛用作远曲小管或集合管的模型
广泛用于多种病毒的扩增和纯化,如流感病毒病毒、人类柯萨奇病毒、呼肠孤病毒和腺相关病毒等
用于观察流感病毒株对细胞功能的影响
用于代谢研究和Pg级药物与药物相互作用研究
用于研究β淀粉前体蛋白的形成及其蛋白水解产物的分类
用于甲、乙型流感疫苗生产的细胞系之一
MDCK细胞的广泛使用出现的一个重要问题是其安全性。据报道,MDCK细胞对免疫缺陷性动物具有不同程度的致瘤性,并且宿主细胞DNA残留也会有潜在的危险性。尽管在MDCK细胞基质流感疫苗生产过程中,通过超滤、核酸酶处理、层析、β-丙内酯灭活等方法可以去除多数宿主MDCK细胞残留DNA,但疫苗产品中仍有可能残留。
为控制疫苗生产质量,需要对疫苗生产全过程进行安全性质量控制。君研生物以市场需求出发,研发了MDCK宿主残留DNA检测试剂盒,以监测生物制品中MDCK宿主细胞残留DNA浓度。
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君研生物科技(山西)有限公司成立于2021年,作为独立创新的研发、生产和销售一体型企业,君研专注于为生物医药产业提供符合国际标准的质量安全检测产品和服务。公司位于山西省太原市综改示范区,由海归科学家与业内资深专家领队,建设有 ~3200 平米符合 cGMP 标准和 ISO 13485:2016 体系要求的研发生产基地。
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