行业资讯丨TrypLE和Trypsin的对比以及TrypLE的检测

TrypLE和Trypsin的对比以及TrypLE的检测

胰酶消化的细节，你知道多少？

细胞学实验中我们除了遇到污染的难题之外，消化的问题，也不容小觑。消化不好，就会导致细胞状态变差，甚至死亡。尤其是在某些需要无血清培养的贴壁细胞中，可以尝试用 TrypLE消化细胞，因为TrypLE不需要胰酶抑制剂终止消化，直接用PBS稀释终止消化就可以了。这样避免了与血清的直接接触，血清中的复杂成分也不会干扰细胞潜在的生理功能，改变细胞分裂的正常状态，对于一些敏感细胞来说，这个改变是致命的。

有科学家称，在培养某种上皮细胞时，一开始用trypsin消化血清终止之后，细胞还是正常生长的，但是发现细胞消化重悬之后细胞贴壁，但是不变形，总是以为消化时间过长导致的；后来降低了消化时间，情况未改观，并且一次比一次明显；到最后，细胞附着在培养瓶底部、球形、一直不变形；而变了形的细胞，状态和之前的完全不一样，好像变成了另外一种细胞，最后很快就死亡了。后来更换使用了TrypLE，情况发生好转，因为不需要用血清终止消化，只需要用PBS终止消化就可以了，细胞生长状态明显变好。

让我们看一下TrypLE和Trypsin具体各有什么优缺点吧。

Trypsin的缺点：

细胞损伤大－－Trypsin抑制剂需要将酶快速灭活，这会导致细胞损失或死亡。

需冷冻保存－－Trypsin必须保存在－20 ℃，在经过多次反复冻融或在4 ℃长期保存后，稳定性丧失。

批间差异大－－Trypsin为动物源性，批次之间差异性大。

TrypLE的优势

细胞损伤小－－TrypLE为非动物源性的消化酶，更纯，对细胞损伤更小，提高种板效率。因为TrypLE作用细胞温和，不需要 Trypsin酶抑制剂。

稳定性很高－－TrypLE可以稳定的保存于室温，节省了冷冻空间，同时提供即时可用的便利。

应用范围广－－TrypLE是在有血清或无血清环境中培养的多种不同细胞系的理想选择，可以直接替代您现有步骤中所用的0.25% trypsin EDTA试剂。

TrypLE的超高稳定性

TrypLE表现的动力学及剪切特异性与 Trypsin 非常近似，而其稳定性却比前者有明显提高。工作储存温度可以为室温保存6个月或37℃一周后酶活性仍不丢失。TrypLE试剂的纯度比Trypsin高，室温稳定性比较高。

所以，TrypLE就相当于某些无血清生长的贴壁细胞的救星啦！

TrypLE检测

在单抗药物、疫苗类药物以及细胞治疗药物等生产中， TrypLE已经广泛的被使用来对贴壁细胞进行消化。生物制品生产相关法规中明确了细胞培养时添加物（如TrypLE、核酸酶、BSA等）检测的必要性，故TrypLE的残留量检测也愈发引起重视。

君研生物自主研发的重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒可以有效，快速，便捷地检测各种样品中TrypLE的残留量。